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大鼠肝S9已成為毒理學及化學品安全評估中重要的體外工具
2025-11-24
大鼠肝S9是通過差速離心從誘導處理的大鼠肝臟中提取的細胞質(zhì)與微粒體混合物,富含Ⅰ相代謝酶和Ⅱ相結(jié)合酶,能模擬哺乳動物體內(nèi)藥物或化學物的生物轉(zhuǎn)化過程。因大鼠肝S9兼具代謝活性與操作便捷性,已成為毒理學、藥物研發(fā)及化學品安全評估中重要的體外工具,在多個行業(yè)中發(fā)揮著代謝橋梁的核心作用。一、新藥研發(fā)在藥物早期篩選階段,制藥企業(yè)廣泛使用大鼠肝S9進行代謝穩(wěn)定性測試。將候選化合物與S9孵育,通過LC-MS/MS分析母體藥物降解速率及代謝產(chǎn)物生成情況,快速識別高清除率或易產(chǎn)生毒性代謝物的分...
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成纖維抑制劑已經(jīng)在多個領(lǐng)域展現(xiàn)出價值
2025-11-17
成纖維抑制劑是一類通過調(diào)控成纖維細胞活化、增殖或膠原合成,從而抑制病理性纖維化進程的生物活性物質(zhì),包括小分子化合物(如吡非尼酮、尼達尼布)、單克隆抗體、天然提取物(如姜黃素、積雪草苷)及基因調(diào)控工具。其核心作用在于干預TGF-β/Smad、Wnt等關(guān)鍵信號通路,在多個領(lǐng)域展現(xiàn)出價值。1、醫(yī)藥與臨床治療在特發(fā)性肺纖維化(IPF)、肝硬化、腎間質(zhì)纖維化及心肌纖維化等疾病中,成纖維抑制劑可顯著延緩病情進展。例如,吡非尼酮和尼達尼布已獲FDA批準用于IPF治療,通過抑制成纖維細胞向肌...
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豬肝微粒體的規(guī)模化制備、活性鑒定與長期保存策略
2025-11-17
一、規(guī)模化制備策略組織采集與預處理選擇健康成年豬,迅速剖取肝臟后立即用預冷的生理鹽水或勻漿介質(zhì)(如含0.1mmol/LEDTA的0.25mol/L蔗糖-Tris-HCl緩沖液,pH7.4)沖洗,去除殘留血液和結(jié)締組織。肝臟剪碎后按1:3-1:5(w/v)比例加入緩沖液,使用勻漿器在低溫下勻漿至無可見顆粒,制成肝勻漿。差速離心分離將勻漿液在4℃條件下進行梯度離心:第一步離心:600-1000g離心5-10分鐘,去除細胞核、線粒體等沉淀,收集上清液。第二步離心:將上清液于10,0...
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微粒體定制系列(九)——兔肝微粒體Rabbit Liver Microsomes
2025-11-12
引言歡迎大家來到#齊氏生物##微粒體#定制系列短文,兔肝微粒體((RabbitLiverMicrosomes)因其在代謝特征上與人類較高的相似性,尤其對睪酮的羥基化代謝模式(主要產(chǎn)生6β-羥基睪酮)與人類高度一致,這使其成為研究經(jīng)CYP3A4和CYP2C代謝藥物的理想模型。一、兔肝微粒體RabbitLiverMicrosomes作為體外藥物代謝研究工具,兔肝微粒體(RabbitLiverMicrosomes)是兔肝組織經(jīng)勻漿和差速離心后獲得的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡結(jié)構(gòu),富含Ⅰ相代謝酶(如...
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“修復者”TA102的低變之謎
2025-10-31
引言上個月在嘉興的藥物安評毒理年會上,齊氏生物團隊和多位老師聊到#TA102菌株#,大家一致反映TA102在Ames試驗中表現(xiàn)出的“不敏感”,即回復突變率“較低”甚至個別試驗沒有突變。針對這個問題,今天從遺傳構(gòu)造和檢測原理角度淺談一下,揭示其背后的“清潔工”機制,并提供相關(guān)解決思路,希望給同行老師們提供一些參考。在Ames試驗中觀察到TA102菌株的自發(fā)回變菌落數(shù)(即突變率)相對“較低”,其實是一個常見的現(xiàn)象。這并非意味著TA102不敏感,而是由其獨特的遺傳構(gòu)造和檢測原理決定...
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拯救你的原代細胞:從識別鉀離子毒性開始
2025-10-30
引言開學以來,陸續(xù)收到細胞群(QQ:386500167)里關(guān)于細胞凋亡的咨詢,情形很類似,大概原代細胞剛開始培養(yǎng)不錯,但在1-2天內(nèi)發(fā)生大面積凋亡。今天從鉀離子過高的角度,詳細解釋下導致這種“延遲性”的凋亡,并提供一套完整的排查思路和解決方案,供大家參考!為什么鉀離子過高會導致“延遲性”大面積凋亡?原代細胞不像永生化細胞系那樣耐受性強,它們對微環(huán)境的變化極其敏感。鉀離子的影響不是像消毒劑那樣瞬間殺滅,而是通過破壞細胞的基本穩(wěn)態(tài),最終觸發(fā)凋亡程序。這個過程需要時間,從而表現(xiàn)為“...
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一文與您分享成纖維抑制劑的正確使用方法
2025-10-23
成纖維抑制劑能有效阻止或延緩不溶性纖維狀沉淀物(如硅酸鹽、碳酸鈣、金屬氫氧化物等)的形成與聚集,廣泛應用于反滲透系統(tǒng)阻垢、實驗室樣品防凝膠化、細胞培養(yǎng)基穩(wěn)定及高濃度溶液儲存等場景。然而,若使用不當,不僅難以發(fā)揮功效,還可能干擾后續(xù)實驗或造成設(shè)備損傷。掌握成纖維抑制劑正確使用方法,是實現(xiàn)精準的核心。一、明確目標,選對類型成纖維抑制劑種類繁多,作用機制各異。常見的有聚丙烯酸類、膦酸鹽類、有機磷酸酯類及天然聚合物(如檸檬酸鹽)。使用前需明確抑制對象:針對硅垢應選用硅分散劑,防鈣垢則...
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纖維細胞試劑盒的工作原理與獨特優(yōu)勢
2025-10-22
纖維細胞試劑盒,尤其是基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理的試劑盒,是生物醫(yī)學研究和臨床診斷中的重要工具,其工作原理與獨特優(yōu)勢如下:工作原理纖維細胞試劑盒(以成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒為例)主要基于雙抗體夾心法或競爭法原理工作:雙抗體夾心法:將特異性抗體包被在微孔板上作為固相抗體,加入樣本后,樣本中的抗原(如成纖維細胞生長因子)與固相抗體結(jié)合。隨后加入酶標記的特異性抗體,形成固相抗體-抗原-酶標抗體復合物。經(jīng)過洗滌去除未結(jié)合的成分后,加入底物顯色,通過酶標儀測定吸光...